产品目录   Product catalog
联系我们   Contact
搜索   Search
技术文章   Article优乐国际娱乐登录>>技术文章>>使用E2定量elisa优乐国际娱乐登录做试验出现结果很弱的原因

使用E2定量elisa优乐国际娱乐登录做试验出现结果很弱的原因

点击次数:79 发布时间:2019-03-21

  使用E2定量elisa优乐国际娱乐登录做试验出现结果很弱的原因
  ELISA试验出现非常弱的结果,常见有7种原因,其解决方法如下:
  1)可能原因:温育的时间或者温度不够;
  解决方法:校正温育箱温度。
  2)可能原因:显色反应时间太短;
  解决方法:校正定时钟准确定时。
  3)可能原因:所用配制缓冲液的蒸馏水有问题;
  解决方法:使用新鲜合格的蒸馏水。
  4)可能原因:加入抗体/酶的稀释液浓度太低;
  解决方法:按照说明书保存E2定量elisa优乐国际娱乐登录和准确配制工作液。校正移液器,吸嘴要配套,装吸嘴时要紧密。
  5)可能原因:酶标仪滤光片不正确;
  解决方法:检查酶标仪使用的滤光片。
  6)可能原因:E2定量elisa优乐国际娱乐登录没有充分平衡;
  解决方法:试剂室温平衡至少20分钟,确保所有试剂已平衡至室温。
  7)可能原因:不正确的试剂储存方式;
  解决方法:按照说明书要求保存E2定量elisa优乐国际娱乐登录。
  2、试验的标准曲线和测定的重复性差,这是什么原因造成的?
  答:试验的标准曲线和测定的重复性差,这是典型的由测定操作引起的问题,常见原因如下:
  a)可能原因:加样本及试剂量不准;孔间不一致;
  解决方法:校正移液器,吸嘴要配套,装吸嘴时要紧密。
  重复某一样品时,加样时间尽可能与第一次接近;
  重复测定标本,操作条件、人员等应尽可能与上次保持一致,以排除这些因素造成的不一致的可能性;
  样品稀释前应充分混匀。
  b)可能原因:加样过快,孔间发生污染;
  解决方法:重复测定标本,操作条件、人员等应尽可能与上次保持一致,以排除这些因素造成的不一致的可能性;加样不要过快。
  c)可能原因:加错样本;
  解决方法:检查记录和试剂,是否加错样本。
  d)可能原因:加样本及试剂时,加在孔壁上部非包被区;
  解决方法:加样枪头不要贴壁。
  e)可能原因:不同批号E2定量elisa优乐国际娱乐登录中组分混用;
  解决方法:不同批号E2定量elisa优乐国际娱乐登录中组分不可混用。
  f)可能原因:温育时间、洗板、显色时间不一致;
  解决方法:检查时间是否一致。
  g)可能原因:孔内污染杂物;
  解决方法:离心样品,排除杂物。
  h)可能原因:试剂/样品没有混匀;
  解决方法:充分混匀样品和试剂。
  i)可能原因:血清标本未完全凝固即加入,反应孔内出现纤维蛋白凝固或残留血
  细胞,易出现假阳性反应等。
  解决方法:待血清标本完全凝固后做试验。
  3、试验结果白板,而且阳性对照不显色,应如何分析和查找原因?
  答:试验结果白板,而且阳性对照不显色,常见原因如下:
  a)可能原因:漏加或者误加试剂;
  解决方法:检查试验记录和剩余试剂。每次加液前均应核对标签。
  b)可能原因:试剂过期;
  解决方法:使用有效期内的产品。
  c)可能原因:洗板液配制中出现问题,如量筒不干净含HRP酶抑制物(叠氮钠
  等);
  解决方法:使用干净的器皿,正确配制试剂。
  d)可能原因:温育的时间或温度不够;
  解决方法:校正温育箱温度。
  e)可能原因:标准品失活或者丢失;
  解决方法:标准品正确保存、溶解和混匀。
  f)可能原因:抗体失活或者丢失;
  解决方法:更换抗体或者提高抗体浓度
  g)可能原因:酶失活或者丢失
  检查方法:把工作浓度的酶再稀释20-100倍,取5uL加入50ul的显色底物,终止后显色是否能达到1.0左右,此为酶的粗略估计。
  解决方法:更换酶或者提高酶的浓度。
  h)可能原因:显色底物失活
  检查方法:加少量的工作浓度的酶,TMB是否很快显色。
  解决办法:更换显色底物.
  4.试验结果空白背景高,这是什么原因造成的?
  答:试验结果空白背景高,常见原因如下:
  a)可能原因:洗板不干净;
  解决方法:充分洗涤,彻底拍干;洗板要防止交叉污染;浓缩洗液准确配制;吸嘴尽可能一次性使用;加样或加酶拍板的滤纸应弃去不用,不要反复使用,否则易造成污染。
  b)可能原因:显色液变质或者试剂过期;
  解决方法:检查E2定量elisa优乐国际娱乐登录有效期。
  c)可能原因:试剂稀释有误,如加酶的浓度过高;
  解决方法:请按说明书所示稀释倍数配制;
  d)可能原因:蒸馏水受酶等污染;
  解决方法:使用新鲜蒸馏水;
  e)可能原因:试剂混用;
  解决方法:不同批号试剂勿混用。
  f)可能原因:培养箱温度超过37℃或反应时间过长。 上一篇 叶绿体Elisa优乐国际娱乐登录实验看似简单,其实不然 下一篇 人CYCLIN B1抗体酶联免疫分析说明

021-69985169
13611928337

推荐收藏该企业网站
—美高梅官方网站—手机美高梅游戏网址 —优德w88手机版下载—优德w88官网客户端 —澳门永利注册—澳门永利国际平台 —炸金花赢话费—真人版炸金花赢话费 —名人娱乐登录网址—名人娱乐官方app下载 条评论
Sitemap