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大鼠骨形成蛋白-2(BMP-2)酶联免疫分析操作步骤

点击次数:107 发布时间:2019-04-17

分析操作步骤

优乐国际娱乐登录1. 标准品的稀释:本优乐国际娱乐登录提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀

释。

优乐国际娱乐登录8μg/L 5 号标准品 150μl 的原倍标准品加入150μl 标准品稀释液

4μg/L 4 号标准品 150μl 的5 号标准品加入150μl 标准品稀释液

2μg/L 3 号标准品 150μl 的4 号标准品加入150μl 标准品稀释液

1μg/L 2 号标准品 150μl 的3 号标准品加入150μl 标准品稀释液

0.5μg/L 1 号标准品 150μl 的2 号标准品加入150μl 标准品稀释液

优乐国际娱乐登录2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、

优乐国际娱乐登录待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,

优乐国际娱乐登录然后再加待测样品10μl(样品*终稀释度为5 倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽

量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。

3. 温育:用封板膜封板后置37℃温育30 分钟。

4. 配液:将30 倍浓缩洗涤液用蒸馏水30 倍稀释后备用

5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30 秒后弃去,如此

优乐国际娱乐登录重复5 次,拍干。

6. 加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。

7. 温育:操作同3。

优乐国际娱乐登录8. 洗涤:操作同5。

优乐国际娱乐登录9. 显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色

15 分钟.

10. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。

11. 测定:以空白空调零,450nm 波长依序测量各孔的吸光度(OD 值)。 测定应在加终止

优乐国际娱乐登录液后15 分钟以内进行。

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